本文標題:"熒光顯微鏡的應用-使用光源與電鏡相比較有何特點"
熒光顯微鏡的應用-使用光源與電鏡相比較有何特點
熒光顯微鏡具有一定的用途。含染料的熒光抗體與細胞結構某些分子結合后,
用熒光顯微鏡觀察是特別合適的。這種顯微鏡與暗視野顯微鏡類似,用長波紫外線
(360纖米) 做光源
熒光顯微鏡近來在臨床診斷上得到廣泛應用,可采用特異性熒光抗體對某種可
疑致病原加以檢驗。
電子顯微鏡出現于第二次世界大戰的前夕。自從問世以來,已經證明,對于細
胞構造、病毒乃至分子結構的分析,電子顯微鏡是一個強有力的工具。在電子顯微
鏡中,電子束被磁場聚焦,而磁場就相當于光學顯微鏡中的透鏡。電子顯微鏡所成
的物象,要在熒光屏上觀察,也可攝成照片。
電子顯微鏡的分辨本領要比光學顯微鏡大400 倍,理論上可達2,000 倍。雖然
電子束的波長是很短的,例如50千伏的電子束波長為0.005 纖米,但電子顯微鏡中
數值孔徑只有0.0005左右。
電子顯微鏡的成象,是由于細胞的分子結構對電子的差別散射造成的。不論材
料的化學組成如何,材料越厚散射越強。由于氣體也能散射電子,所以生物樣品應
放在真空中進行觀察,因為空氣分子對電子的散射可使生物樣品的差別散射失真。
同時樣品還必須保持干燥。如果樣品含水,在真空中會變成水蒸氣,其作用同
空氣一樣。樣品的切片要非常之薄,否則電子就要全部被散射掉,在電鏡照片上就
看不到結構的細節。
生物樣品各部分的密度差別很小,在觀察前應當進行區別染色,就是說一些結
構重染,另一些結構輕染。切片的染色法有正染色法和負染色法。
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