本文標題:"動物細胞標準的激發源成像細胞分析顯微鏡"
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動物細胞標準的激發源成像細胞分析顯微鏡
哺乳動物細胞時延性共聚焦成像以下的許多步驟適用于任何配置
的顯微鏡,不過本例是關于時延性共聚焦成像的,這是一個普通的
GFP時延性成像試驗,使用的是激光掃描共聚焦顯微鏡。1.除了是
在二氧化碳濃度可以控制的環境中捕獲細胞影像,其他條件下成像
均需要補充不同的大氣二氧化碳水平。例如,如果需要含有血清的
生長培養基,加入25mmol/L HEPES,pH7.6,可以滿足某種類型
的細胞成像。如果可能的話,用小型儀器監測緩沖液中的細胞。2
.用括號中的任一儀器保持成像細胞的溫度(例如,完全封閉的顯
微鏡培養箱,循環水浴溫度控制器,獨立控制的階段加熱器,熱空
氣對流元件)。注意:這些溫度控制元件的效率和價格按照從前到
后依次遞減。3.各種可用的熒光蛋白極大地降低了成像的硬件要
求。使用標準的激發源和濾過設備能捕獲很多這些蛋白質。表5.1
0.1列出了激光激發源的一些常用變量。4.EGFP和EYFP,作為最
常用的綠色熒光蛋白,能在一定程度上抵抗光漂白作用,但是在任
何試驗中都要考慮這種現象。應該盡可能地降低這些激發力,以延
長熒光標記物的壽命。5.通常盡可能地保持蛋白質的低表達,
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