本文標(biāo)題:"植物質(zhì)體分析-葉綠體觀察生物顯微鏡"
植物質(zhì)體分析-葉綠體觀察生物顯微鏡
幾乎所有植物組織中都有質(zhì)體存在。所有質(zhì)體都由至少兩層膜包圍。
葉綠體是研究的最透徹的質(zhì)體,以具有稱為類囊體的能進(jìn)行光合作用的內(nèi)膜為特征.、
非綠色質(zhì)體幾乎不含內(nèi)膜,通常存在于根部、花和果實(shí)中
分離到的葉綠體通常用于研究蛋白定位、蛋白合成和光合作用:
這種方法主要用于分離豌豆和菠菜中的質(zhì)體.經(jīng)過改進(jìn)后可用于
其他物種的質(zhì)體分離
分離完整葉綠體有二個主要困難:
(1)植物細(xì)胞被堅韌的纖維質(zhì)細(xì)胞壁包圍。破碎細(xì)胞的力量要能足以打破細(xì)胞壁同
時還要保持葉綠體的完整。如果質(zhì)體較小,通過使用帶有剃刀片的Polvtrvn
( Brirkmann)或Wraring攪切器進(jìn)行簡短的勻漿,很大一部分質(zhì)體會從破碎細(xì)胞中完整
地釋放出來。通過Percoll梯度離心,即可將完整質(zhì)體與破碎的質(zhì)體分離開來。
(2)質(zhì)體中由淀粉積累成的致密顆粒會在離心過程中使質(zhì)體破裂。
淀粉的積累可以通過讓植株在短光照時間和/或低光照強(qiáng)度的條件下
生長而得以消除。若有必要,可以在勻漿前將植株置放在黑暗中
24一48小時以去除淀粉。
(3)勻漿過程中.液飽中貯存的有毒物質(zhì)會釋放出來。在有酚類化合物積聚的物種
中,可以通過在研磨緩沖液中加人可溶解的聚乙烯毗咯烷酮、BSA和琉基化合物來降低
其有害影響。
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