本文標(biāo)題:"細(xì)胞大多是透明的所以使用光學(xué)顯微鏡觀察前需染色"
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細(xì)胞大多是透明的所以使用光學(xué)顯微鏡觀察前需染色
由于細(xì)胞絕大多數(shù)為無(wú)色透明體,如果直接置于顯微鏡下是難以分辨的,再加上組
織材料均有一定厚度,難以透光,因此必須進(jìn)行處理。光學(xué)顯微制片術(shù)就是指對(duì)顯微鏡
觀察標(biāo)本進(jìn)行處理以提高分辨力的技術(shù),一般包括制片和染色兩個(gè)步驟。液體材料如血
液、骨髓及表皮組織可直接涂片或鋪片后染色觀察。固體組織材料則需通過(guò)組織切片或
壓片。最常用的方法是石蠟包埋切片,組織材料經(jīng)甲醛、戊二醛等周定劑固定,使細(xì)胞
中的大分子物質(zhì)交聯(lián)而保持原位,再經(jīng)乙醇等脫水劑脫水,然后用熔化的石蠟包埋,在
切片機(jī)上切成1-10μm的薄片,經(jīng)染色后在顯微鏡下觀察。標(biāo)本的染色根據(jù)不同的目
的采用不同的方法,如鐵蘇木精一伊紅(H-E)染色主要用于細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察;硝酸銀
染色用于高爾基體的觀察;鐵蘇木精染色用于線粒體的觀察,蘇丹染料用于脂肪滴的觀
察。另外,細(xì)胞中酶的顯示、化學(xué)成分如DNA, RNA,糖原的顯示,還可通過(guò)特殊制片
染色如酶標(biāo)記、放射自顯影、膠體金標(biāo)記在光學(xué)顯微鏡下觀察。
光學(xué)顯微鏡技術(shù)是一項(xiàng)比較傳統(tǒng)的技術(shù),雖然不能對(duì)細(xì)胞進(jìn)行十分精細(xì)的研究觀察,
但由于其技術(shù)性要求不很高,容易普及,再加上很多實(shí)際問(wèn)題和一般性研究問(wèn)題的需
要,至今仍被廣泛使用。
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