本文標(biāo)題:"細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)用熒光分析圖像顯微鏡"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類(lèi): 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)用熒光分析圖像顯微鏡
通過(guò)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體報(bào)告的基于Pyranine的pH測(cè)定法,其中存在的一個(gè)問(wèn)題是染
料pH敏感性的鈍化。特別是在最初的時(shí)間點(diǎn)或采用高度穩(wěn)定的脂質(zhì)體時(shí)
如已知脂質(zhì)體是處于中性pH,這種作用卻在
光譜上顯示為明顯的脂質(zhì)體囊內(nèi)酸化。這種假象的部分原因在于Pyranine與脂質(zhì)體
膜界面區(qū)的相互作用,也有部分原因是由于高濃度時(shí)染料一染料的相互作用。
雖然Pyranine法簡(jiǎn)單并且能準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)胞內(nèi)pH,但如孵育時(shí)間較長(zhǎng)(脂質(zhì)體開(kāi)始滲漏)
或使用較不穩(wěn)定的脂質(zhì)體時(shí).最好采取另一方法.這種方法與Pyranine法一樣,都
是基于熒光比值,但采用了雙熒光團(tuán),并通過(guò)親水性的間隔臂共價(jià)結(jié)合,使熒光團(tuán)定
位于脂質(zhì)體外部
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