本文標題:"標準平板計數法計數微生物是最廣泛應用的一種方法"
發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------
人瀏覽過-----時間:2015-5-14 5:41:35
標準平板計數法計數微生物是最廣泛應用的一種方法
從環境試樣中分離微生物的過程常常需要進一步分離從涂布或傾注平板法中
發現的單個菌落,對其鑒定或確認。在這個方法中,常用無菌接種環把菌落從原
始培養平板中挑取并劃線稀釋到新的瓊脂培養皿中
標準平板計數法計數微生物是微生物學中最古老、最廣泛應用的一種方法。
盡管廣泛應用,這種稀釋平板技術自從它的使用之初就受到懷疑和批評。主要批
評的一點是:像顯微觀察那祥,整個群體中僅有很少部分能在實驗室培養基中培
養。大量文獻說明,直接顯微計數的細胞數中只有1%一10%的細胞能用平板計
數技術復活成可活的細菌。各種方法之間存在的巨大差異可能是多
方面的因素產生的。首先,低底物水平的環境試樣中含有一些營養饑餓或寡營養
生物,它們生長得很慢或根本就不可培養,所以不能在規定時間內形成菌落;其
次,由于提取和稀釋過程中施加的壓迫導致活的微生物變得不可培養;再一個原
因就是菌落形成過程中細菌間的競爭抑制了某些微生物的生長;另外,所有微生
物都在營養物和電子受體需求方面有不同的最適宜及最低的生長條件。因此,某
些微生物在培養基中長得很慢或根本不生長。因為大多數自然環境都是寡營養
的,因而平板培養基的營養狀況是進行活細胞計數所考慮的重點。許多土壤分離
菌在貧營養培養基中比富營養培養基中生長、繁殖得更好。最后,活細菌的回收
(指使一個細胞形成一個菌落)所產生的偏差是由于提取步驟中細菌從土壤顆粒
中的不完全釋放或稀釋過程中細菌的不完全分離。這使得菌團長成了單個菌落,
從而導致出現的菌落數偏低。很難確定這些因素中是哪一種導致直接計數與活細
胞計數間存在的1-2個數量級的差異。
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