本文標(biāo)題："顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定染色率"
發(fā)布者：yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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顯微鏡觀察酵母形狀檢片,在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定染色率
染色率的測(cè)定
活的細(xì)胞因新陳代謝不停地進(jìn)行，所以細(xì)胞內(nèi)氧化還原
值(rH)頗小，還原力強(qiáng)，對(duì)無(wú)毒染料能還原脫色；而死細(xì)胞
及代謝緩慢的老細(xì)胞，無(wú)此還原力。次甲基藍(lán)(美藍(lán))無(wú)毒，
能被活細(xì)胞還原為無(wú)色，故用以區(qū)別細(xì)胞的死活，以染色率
表示之。
用上述觀察酵母形態(tài)的檢片，在測(cè)定出芽率的同時(shí)測(cè)定
染色率。計(jì)算時(shí)一般取3～5個(gè)視野的平均數(shù)。
酒母醪常易為各種細(xì)菌所污染。細(xì)菌個(gè)體小，消光率
小，在顯微鏡下不易明顯觀察，且細(xì)菌種類繁多，在工廠生
產(chǎn)條件下，檢查和鑒別是一件相當(dāng)復(fù)雜和困難的事。在生產(chǎn)
中可采用一般的染色方法粗略地加以檢定。
(1)試劑
①齊氏石炭酸復(fù)紅染色液(試劑120)
②香柏油
③二甲苯
(2)測(cè)定步驟
①檢片的制備取浸泡于酒精中的干凈的載玻片一塊，
在酒精燈上燒去殘酒(不要用布或紙抹)后，涂試樣一小滴
于載玻片中央，在火焰上通過(guò)2～3次，使涂片上的菌體貼
牢于載片上，以免染色洗滌時(shí)脫落(通過(guò)火焰固定涂片時(shí)，
要注意掌握通過(guò)火焰的速度和溫度，過(guò)快不易固定，過(guò)慢則
因溫度過(guò)高，細(xì)胞易變形。蛋白質(zhì)在70℃以上就能凝固，
固定于載片上)。
載片固定后，滴數(shù)滴齊氏石炭酸復(fù)紅染色液于涂片上，
稍加熱，靜置1分鐘。染色時(shí)間一到，即用自來(lái)水沖洗，將
涂片上的染色液洗去(注意!水要沖在涂面旁邊，不要對(duì)準(zhǔn)
涂面沖)，而后用吸水紙吸千，稍停片刻，即可鏡檢。
②鏡檢方法將載片置于顯微鏡下，用油鏡觀察。先
數(shù)酵母總數(shù)，再數(shù)同一視野內(nèi)被復(fù)紅染色之桿菌等的細(xì)胞
數(shù)，鏡檢3-5個(gè)視野，計(jì)算雜菌率。
酵母細(xì)胞數(shù)的測(cè)定
酵母細(xì)胞數(shù)是成熟酒母醪的一項(xiàng)主要控制指標(biāo)，是衡量
酒母質(zhì)量、控制工藝操作的重要根據(jù)。因此，必須熟練地掌
握酵母細(xì)胞數(shù)的測(cè)定方法，及時(shí)地滿足生產(chǎn)的需要。
所用儀器和試劑
血球計(jì)測(cè)定酵母細(xì)胞數(shù)通常應(yīng)用血球計(jì)。血球計(jì)
為一塊具有H形溝槽的厚玻片
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