本文標題:"復制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡"
發布者:yiyi ------ 分類: 行業動態 ------
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復制DNA分子的高分辨率電子顯微鏡圖分析顯微鏡
DNA連接酶
無論從帶有引物的環狀單鏈還是從缺口上復制都不會得到連續
的子鏈,這種不連續性是因為沒有一種已知的聚合酶能夠把基團
和基團連接進來,這些基團的連接是由DNA連接酶完成的,這種酶
在復制以及其他重要過程中發揮作用。
大腸桿菌連接酶能夠把相連接,只要這兩個基團都在相鄰脫氧
苷酸堿基配對的末端,這種酶不能填補缺口。
在一般的聚合反應中,形成磷酸二酯鍵所需要的活化能來自三
磷酸鹽的裂解,歷為DNA連接酶只有單磷酸鹽參與, 所以需要有
其他的能量來源,這一能量取自ATP或DNA的水解,究竟用哪一種
能量由DNA連接酶所在的生物所決定,大腸桿菌DNA連接酶用NAD作
為能量來源。
結果證明法數左右的岡崎片段是真正的前體片段,不連續全成
模型大概是正確的,進一步支持這一模型的是復制DNA分子的高分
辨率電子顯微鏡圖,在復制叉有一邊顯示一個短單鏈區域,這一
區域的起因是,不連續鏈的合成的起始是周期性的,也許起始需
要特定的堿基順序或某些其他信號,事實上,連續復制畹的末端
常常處在不連續鏈的前沿,因此用了前導鏈和后隨鏈這兩個術語
分別表示連續復制鏈和不連續復制鏈。
上述實驗都是在大腸桿菌中進行的,是一種普遍現象,因為曾
在許多細菌、噬菌體、動物病毒和真核生物中觀察到。在真核生
物中片段長度只有100至200個堿基,但還不了解這些小片段究竟
是代表前體片段的真實長度,或僅僅是由于有較多的結果,因為
還沒有從真核生物中分離到突變體。
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