本文標題:"視頻光學/電子顯微鏡技術-生物圖像顯微鏡"
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這種方法采用免疫金染色法和免疫過氧化物酶染色法來做電鏡
標本的染色。通常免疫金染色法常用來標記絕大部分抗原;而免疫
過氧化物酶染色法通常僅用來標記那些位于膜包被的小問隔內的抗
原,這是因為過氧化物酶反應生成的電子致密產物易從抗體結合處
彌散開只有采用免疫金染色法才能標記位于胞質內的GFP融合蛋白
質的抗原決定簇。此外,HRP(辣根過氧化物酶)標記也適用于其他
的抗原決定簇.
值得一提的是,許多用免疫熒光顯示結果非常好的抗體在免疫
源性電鏡染色中不甚理想,因為在多數電鏡標本的固定過程中用到
的戊二醛很容易與抗原決定簇中的氨基酸基團橋聯到一起;然而,
若是減少或者不用戊二醛會造成細胞內細胞器的超微結構無法很好
保存。如果免疫源性電鏡標記行不通,可以采用一些調節手段,例
如,優化固定過程中戊二醛的濃度或者換用高碘酸鹽、賴氨酸、多
聚甲醛固定
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