本文標題:"熒光顯微技術能夠直接、及時觀察細胞膜的變化"
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FRET原理是一熒光物質(donor)受到特定波長的光線照射后會被激發而發出另一特定波長的光,
此能量轉移的距離約7-10 nm,在此距離內若有一接收者
(acceptor)則此能量會被吸收,而熒光減弱。FRET廣泛應用于膜蛋白的研究
藉由donor與acceptor標識在欲觀察的分子上,便可由熒光強弱知道兩種
分子結合與混合程度。Fluorescence quenching與FRET的原理類似,
這類熒光分子在高濃度(~70mM)彼此距離接近時會發生分子之間會發生self-quenching的現
象而讓熒光減弱,而在低濃度時熒光較強。Fluorescence quenching經常被運用到
微胞洩漏實驗,當細胞膜上有破洞產生時,如果熒光分子外洩則濃度降低,
因而造成熒光強度變化。FRAP的原理是在細胞膜的局部區域,
以激光光源集中激發局部區域, 讓其造成分子局部的熒光漂白,再來測量熒光回復的速度。
而從回復的速度可以知道脂質分子擴散速率,進而了解細胞膜相變的機制。
相較于前面所提的熒光技術,熒光顯微技術是一個能夠直接、及時觀察細胞膜上
變化的技術。當人造膜上有兩種區塊共存時,
被標識的熒光分子會選擇停留在特定的區塊而產生熒光分部不均勻,
來提供足夠的反差來觀察人造膜上區塊尺寸大小、形狀與動態行為
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