本文標題:"液層時液滴的大小會隨蔗糖梯度的變化-實驗顯微鏡"
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液層時液滴的大小會隨蔗糖梯度的變化-實驗顯微鏡
部分收集器必須與蠕動泵連成一體,以測定收集所需體積花費
的時間。收集所需
液層時最好以時間為基礎而不測定液滴大小,因為液滴的大小會
隨蔗糖梯度的變化
而變化。為收集某一特定液層,要測定所需要的泵速、時間和液
滴數。首先用水然
后用模擬的蔗糖梯度演練區帶收集。根據分辨率要求選擇試管編
號和需要的相應組
分。該組分不應小于加到蔗糖梯度上的樣品體積。2.玻璃毛細
吸量管與蠕動泵的微孔管的頂端連接。在梯度離心管帽的中央打一
小孔。
離心管帽位于管口的外面,毛細吸量管可通過該小孔進入試管。
3.將第一個梯度樣品管放在緊靠蠕動泵的架子上并牢牢固定。蓋
上試管帽,通過帽上
的小孔緩慢放置毛細吸量管進入樣品管內,小心不要攪動梯度,
確保放置的毛細吸
量管位于試管底部的中央,位置由試管帽支撐。4.同時打開蠕
動泵和部分收集器,首先收集的是底部高密度層,然后是頂部的低
密度
層。樣品管4℃保存,用于測定各組分中的目的蛋白和/或標志
蛋白。支持方案2 沉降系數的計算
一種未知樣品的沉降系數S可直接從樣品的分離參數和在離心場
的遷移計算出來。
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