本文標(biāo)題:"分子質(zhì)量標(biāo)志物用來(lái)測(cè)定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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分子質(zhì)量標(biāo)志物用來(lái)測(cè)定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)
普通分子質(zhì)量標(biāo)志物的應(yīng)用和制備
分子質(zhì)量標(biāo)志物的最大用途是測(cè)定未知蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)和分
子質(zhì)量,可分為單個(gè)樣品和混合樣品的標(biāo)志物。盡管有諸多限制,
但是仍可與通過(guò)水溶性球狀蛋白的比較,按下述公式推算出分子質(zhì)
量:
提供了一些水溶性蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)和分子質(zhì)量。對(duì)于一個(gè)給
定的沉降實(shí)驗(yàn),最好選用沉降系數(shù)在預(yù)期范圍內(nèi)的2或3種蛋白質(zhì)作
為標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于特殊樣品,要盡量尋找分子質(zhì)量在預(yù)期范圍內(nèi)的蛋白
質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)。然而,這些標(biāo)準(zhǔn)不適合于計(jì)算有不同偏微比容(u)蛋
白質(zhì)的沉降系數(shù)。盡管如此,可溶性標(biāo)準(zhǔn)品在比較不同的沉降方式
和確保梯度的重復(fù)性方面非常有用。此外,測(cè)得的相對(duì)沉降系數(shù)可
用于測(cè)定一個(gè)給定蛋白質(zhì)亞單位的寡聚體,而不用考慮它的構(gòu)象。
最后,通過(guò)與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的比較,可以估算出蛋白質(zhì)的分子質(zhì)
量。然而,必須認(rèn)識(shí)到這種分析是假設(shè)結(jié)合了去污劑的測(cè)試樣品和
標(biāo)準(zhǔn)品有相似的微分比容,因而有其局限性。表6.2.2常用標(biāo)準(zhǔn)
蛋白質(zhì)的沉降系數(shù)、偏微比容和分子質(zhì)量。
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